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培養基中丙酮酸鈉的作用是什么?

更新時間:2019-10-24   點擊次數:8865次

    丙酮酸鈉可以作為細胞培養中的替代碳源,盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是,如果沒有葡萄糖的話,細胞也可以代謝丙酮酸鈉。丙酮酸鈉的貯存液濃度一般為50mM,-20℃保存,培養基中的終濃度為1mM.

     丙酮酸鈉是zui常見的丙酮酸鹽,是一類內源性小分子物質,丙酮酸鈉和丙酮酸均是天然存在于人體內,并參與全身各組織和器官的代謝。丙酮酸鈉在醫學上、診斷試劑以及醫療器械中被廣泛用作緩沖劑、賦形劑和抗氧化劑。此外丙酮酸鈉在細胞培養中也是常用到的試劑之一,那么丙酮酸鈉在細胞培養中的作用是什么呢?

    酮酸鈉在細胞培養中的作用:丙酮酸鈉在人體日常生活中,是惹你進行代謝生命活動所必須的,它是一種能量物質,在科學研究進行的細胞培養試驗中,科學研究工作人員還發現了有作用類似的物質,類似參與身體代謝活動的為人體提供行動的能量的物質還有葡萄糖,乳酸鈉等,在人體中大多數細胞只利用葡萄糖就夠了,在細胞培養中丙酮酸鈉是必須的物質。丙酮酸鈉在培養基中起到替代碳源的作用,參與細胞營養代謝。

    丙酮酸鈉制備:

    將領取的丙酮酸在車間內放置一小時以上,將抽料管用干凈的聚酯纖維布包住管口,緩緩插入桶底部,用真空將丙酮酸 280kg抽入丙酮酸鈉反應罐內,抽畢,開攪拌,開攪拌,將預處理好的38~42℃碳酸鈉溶液緩緩壓至反應罐內(控制壓力在0.03~0.06MPa),控制反應罐內溫度不超過35℃(若反應過程中,溫度超過35℃,應采取降溫措施),反應過程中應進行pH值檢測,當反應液pH值達到4.8~5.3(用精密試紙測定)時停止加料,控制加料時間約1小時,反應完畢,將1440kg 95%乙醇緩緩抽入(管口應用干凈的聚酯纖維布包?。┓磻迌龋尤霑r速度應先慢后快,開始50%的量加入時間應控制在60分鐘內,后50%的量加入時間控制在30分鐘內),抽畢,離心甩干,放入不銹鋼桶內送入烘房,倒入雙錐真空干燥箱內,控制真空度≥-0.09Mpa,熱水溫度為75~80℃,真空干燥器內溫上升為65℃時,記錄起烘時間,控制真空干燥器內溫度為65~70℃,保溫2小時,自起烘2小時后,請驗,干失≤0.5%,冷卻約20分鐘,出料,用20目過篩,包裝,入庫。收率應在105±5%之間。
 
    Hank's 平衡鹽溶液(HBS)要在空氣中使用,不需要CO2培養箱。原因是什么?Hank's 平衡鹽溶液(HBS)和Earle's平衡鹽溶液(EBS)有什么本質的功能差別?

    HBS和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagles (2.2g/L)中比在Hanks (0.35g/L) 中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡,以維持溶液的PH值。Eagles液在空氣水平的CO2 中,溶液會變堿,Hanks液在CO2培養箱中會變酸。如果希望在CO2培養箱中保存組織,需要用Eagles液,。如果僅僅是清洗將要在細胞培養基中儲存的組織,用Hanks液就可以了。




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