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人乙酰肝素酶試劑盒操作原理及步驟

更新時間:2011-10-19   點擊次數:2047次

人乙酰肝素酶試劑盒檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人乙酰肝素酶(HPA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人乙酰肝素酶(HPA)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

人乙酰肝素酶試劑盒操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL

4.  隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.  每孔加入底物AB50μL37℃避光孵育15min

7.  每孔加入終止液50μL15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

人乙酰肝素酶試劑盒  人HPA試劑盒  Elisa試劑盒




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