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神經組織細胞培養方法

更新時間:2012-09-13   點擊次數:1570次
  1、獲取腦組織后,先仔細剝除腦膜和血管等纖維成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍的Hanks液中,腦組織比較柔軟,反復吹打即可制成細胞懸液,
  
  2、為排除脂肪成分和其它碎塊,把懸液注入離心管中,在室溫直立5~10分鐘后,細胞或細胞團塊自然下沉,脂肪等雜物易漂浮于懸液表層,吸除上清,如此反復二三次可獲得較多的細胞成分,
  
  3、向末次沉淀物中加入適量營養液,通過紗網或紗布濾過,計數細胞并調整好細胞密度,接種入培養瓶或皿中,置5%CO2溫箱中培養,
  
  4、細胞生長匯合后,可用0.25%胰蛋白酶消化法做傳代處理,加消化液的量以能覆蓋細胞層即可,待細胞開始從瓶壁脫離(平均5~10分鐘),加入含有血清培養液,吹打制成細胞懸液,
  
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