人妻有码中文字幕-国产视频一区二区-99热在线观看-在厨房拨开内裤进入毛片

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 酶聯免疫斑點檢測技術特點

酶聯免疫斑點檢測技術特點

更新時間:2013-03-18   點擊次數:1928次

ELISPOT全名為酶聯免疫斑點檢測,英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它結合了細胞培養技術與酶聯免疫吸附技術(即ELISA技術),能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。其技術原理,一句話概括就是:用抗體捕獲培養中的細胞分泌的細胞因子,并以酶聯斑點顯色的方式將其表現出來(Sedgwick JD 2005)。

該技術檢測細胞因子具有三大優點:其一,靈敏度高。在一百萬個陰性細胞中只要有一個分泌細胞因子的陽性細胞即可被檢測出來。這是目前為止,zui為靈敏的檢測技術,靈敏度比傳統的的ELISA方法高2-3個數量級。其二,單細胞水平,活細胞功能檢測。ELISPOT檢測的是單個細胞分泌,而非細胞群體的平均分泌。在檢測的過程中,有活細胞培養與抗原刺激階段,檢測的是活細胞的功能,而非死細胞的物。其三,操作簡便經濟,可以進行高筒量篩選。ELISPOT沒有復雜的細胞體外擴增過程,不使用同位素,不需要大型的、專門的實驗儀器設備。按照標準化的實驗操作,一個實驗者可以同時處理數百個樣品,效率遠遠高于其它檢測方法(Kalyuzhny AE 2005)。

實驗設計在96孔培養板上進行,直接以培養板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質,包被上特異性的單克隆抗體,用以捕獲細胞分泌的細胞因子。(由于涉及到細胞培養的過程,對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體,該抗體需要無毒,不含內毒素,親和力高等特點。)之后,在培養板的孔內加入細胞培養基(現在無血清ELISPOT技術已經成熟,培養基中可以不再含有血清)、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養。

在特異性的抗原或者非特異性的有絲分裂原的刺激下,數小時之內,T細胞就會開始分泌各種細胞因子。細胞因子當即就被位于細胞下方的膜上的單克隆抗體所捕獲。在洗去細胞之后,被捕獲的細胞因子可以與生物素標記的第二抗體結合,然后用酶標親和素再與生物素結合,進行化學酶聯顯色,就可以在膜的局部形成一個個圓形的斑點。每一個斑點就對應了當初一個分泌細胞因子的細胞,這些細胞被稱為斑點形成細胞(Spots forming cells SFCs)。統計膜上的斑點的數目,再除以當初加入孔內的細胞總數,就可以計算出陽性細胞的頻率。

上海恒遠生物有限公司大量供應ELISA試劑盒,酶聯免疫試劑盒,動物elisa試劑盒,抗體(兔單抗、鼠單抗、分裝抗體、免疫組化抗體、二抗、標簽抗體),細胞(ATCC原代細胞、培養基、正常細胞、腫瘤細胞),生化試劑(氨基酸、緩沖劑、分離試劑、培養基、蛋白質、酶、生化酶及輔酶、核酸及其衍生物、碳水化和物、抗生素、染色劑、維生素試劑),Amresco試劑等多家進口產品,歡迎各位新老客戶惠顧!




主站蜘蛛池模板: 乱中年女人伦av一区二区| 成人乱码一区二区三区av| 性色av一二三天美传媒 | 久久久久无码精品国产不卡| 久久久久亚洲av无码专区首jn| 成人免费视频视频在线观看 免费| 国产精品丝袜黑色高跟鞋 | 亚洲熟妇av一区| 日韩精品内射视频免费观看| 久久99精品国产麻豆婷婷| 国产99久9在线视频 | 传媒 | 无码综合天天久久综合网| 暴力强奷在线播放无码| 精品永久久福利一区二区| 国产高清乱码又大又圆| 无码精品一区二区三区免费视频| 少妇愉情理伦片高潮日本| 又粗又大又硬毛片免费看| 天天躁了天天躁了天天躁| 永久黄网站色视频免费观看| 国产果冻豆传媒麻婆| 色妞色综合久久夜夜| 男人把大ji巴放进女人免费视频 | 成人影片麻豆国产影片免费观看 | 大胸美女被吃奶爽死视频| 国产免费久久久久久无码| 18禁裸乳无遮挡啪啪无码免费| 国模吧无码一区二区三区| 特黄aaaaaaa片免费视频| 欧美精品偷自拍另类在线观看 | 国产成人av无码精品| 国产精品自在在线午夜蜜芽tv在线 | 国产亚洲欧美精品永久| 久久久人人人婷婷色东京热| 韩国av片永久免费| 久久99热只有频精品8| 亚洲va成无码人在线观看| 久久人人爽人人爽人人片ⅴ| 日韩精品专区av无码| 青青国产线免观| 伊人色综合一区二区三区|