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ELISA試劑盒:實驗標(biāo)本的作用及比例

更新時間:2014-08-20   點(diǎn)擊次數(shù):1231次

    在朋友們操作ELISA試劑盒實驗時,關(guān)于抗凝血和得到的血清血漿體積的關(guān)系,大致上比例是1毫升全血可以得到500 ul血清或血漿,今天的技術(shù)內(nèi)容,上海恒遠(yuǎn)生物跟您說說實驗標(biāo)本的作用及比例。
    受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,買前要和技術(shù)人員詳細(xì)溝通,有些產(chǎn)品分類很細(xì),同一個項目會有幾個試劑盒。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保存其免疫學(xué)活性,又保存酶的活性。
    購買ELISA試劑盒首先要注意有效期,盡量買剛出廠不久的。大家更多的了解試劑盒無非就是擔(dān)心實驗?zāi)芊癯晒Γ噭┖薪Y(jié)果出來以后如何解釋。只要是商品化試劑盒,都是比較穩(wěn)定的,但一般檢測抗原不如檢測抗體準(zhǔn)確度高。
    由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。需要的樣本量取決于你的檢測項目,有些檢測項目需要血清做1:100稀釋,甚至是更高的稀釋度,那么幾微升血樣就夠了,有些項目只能做較低的稀釋,甚至不稀釋,這樣的話每孔會需要100 ul左右。
    以上內(nèi)容是由上海恒遠(yuǎn)生物公司技術(shù)部人員為您整理的,希望對做實驗的同學(xué)們有所幫助,還需要了解更多詳細(xì)內(nèi)容請查看ELISA試劑盒說明書或我們。

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