根據(jù)前面說到的ELISA質(zhì)量控制中我們知道,由ELISA的性質(zhì)和來源,分為可測誤差、隨機(jī)誤差、人為誤差。在ELISA試劑盒實驗中,只有遵循它應(yīng)有的規(guī)則才能更好的完成實驗,對此,上海恒遠(yuǎn)公司特別為您分析了保證實驗結(jié)果的幾大基礎(chǔ):
1.要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
2.實驗時,要使底物避光保存。
3.用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
4.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
5.要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
6.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。
我公司從事試劑盒銷售多年,有著豐富的科研經(jīng)驗,購買我司ELISA試劑盒全程提供技術(shù)指導(dǎo),如客戶不方便實驗并可提供代測服務(wù),我們承諾代測服務(wù)免費!
ELISA試劑盒實驗基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。
再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。在操作步驟中,還有這幾個必知項目:
1. 溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
2. 將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
3. 洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
4. 洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫6作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5. ELISA試劑盒實驗中,液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。