昨天下午15時,貴陽醫學院杜老師致電我司何咨詢ELISA相關技術。還記得上月中旬,杜老師在我公司購買了大鼠白介素6試劑盒,售后反應非常好,這次來電向我公司何主要咨詢的是ELISA檢測交叉反應。
如果抗體間發生沖突或交叉反應就會影響整個實驗的特異性,其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應的一個因素。在何與客戶交流ELISA交叉反應的過程中,何說道:“盡管現在購買源自動物的抗體越來越容易,我們仍有必要確認一下是否會產生交叉反應的問題。在用雙抗夾心法進行ELISA檢測時,檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗,而不能與捕獲抗體起反應。如果檢測用二抗與捕獲抗體結合,實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗,來避免上述問題。"
如今檢測ELISA有許多途徑,我們可以根據自己的偏好進行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的酶,而反應體系中添加有相應的底物。這種酶促反應具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進行檢測,堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上,也可以結合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標記的酶與親和素標記的一抗結合。此外ELISA的結果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學發光或顯色法檢測等。
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