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原代細胞凍存實驗操作步驟

更新時間:2015-05-06   點擊次數:1745次

原代細胞凍存實驗操作步驟

1、選用生長情況好,數量較多的原代細胞,凍存前一天換液一次。

2、貼壁細胞需用0.25%胰酶常規消化將細胞消化下來,將細胞懸液收集至離心管中。

31000rpm離心5分鐘,棄上清液。

4、沉淀加含DMSO的培養液,計數,調整至(1-10)×106 /ml

5、將懸液分至凍存管中,每管1 ml

6、密封凍存管,封口一定要嚴,否則復蘇時易出現爆裂。

7、用記號筆標明細胞種類,凍存日期。

8、按下列順序降溫:室溫→4(20分鐘〕冰箱冷凍室(30分鐘)→超低溫冰箱(-80℃guoye)→液氮。




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