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上海恒遠生物血清載脂蛋白A1試劑盒性能評價

更新時間:2015-11-05   點擊次數(shù):1475次

           上海恒遠生物血清載脂蛋白A1試劑盒性能評價

載脂蛋白A1(apoli popro tein A1,ApoA1)是高密度脂蛋白(HDL)的主要結(jié)構(gòu)蛋白。其含量基本可反應(yīng)HDL顆多少。血清/血漿樣品ApoA1減少提示心血管(冠心病),腦血管(腦血栓)疾病的危險性增加,常被作為心腦血管疾病的危險性評價的靈敏指標之一,ApoA1含量的測定,對預(yù)防和評價心腦血管疾病比其它脂類和脂蛋白更有效。目前zui為常用測定ApoA1的方法為免疫比濁法,主要是利用抗原與相應(yīng)的抗體發(fā)生特異性反應(yīng),形成抗原-抗體復(fù)合物,并形成一定濁度。該濁度的高低在一定量抗體存在時與抗原的含量成正比。通過與同樣處理的校準液比較,計算未知樣品中的ApoA1含量。現(xiàn)將結(jié)果報告如下: 
  1材料與方法 
  
  均按試劑盒提供測定參數(shù)、測定方法進行。對我司試劑進行精密度、準確度、相關(guān)性、性線范圍、穩(wěn)定性等性能進行測試。 
  2實驗結(jié)果 
  2.1精密度按NCCLS[1]評價方案,取低、中、高三個不同濃度的ApoA1樣本,連續(xù)測20次,再每天測1次,共測20d,結(jié)果見表1 
  表1 批內(nèi)和批間精密度測定結(jié)果(g/L n=20) 
  標本 ApoB 
   批內(nèi) 批間 
   -x SD CV% -x SD CV% 
  低 0.84 0.0138 2.79 0.84 0.0133 2.19 
  中 1.26 0.0176 1.68 1.26 0.0175 1.53 
  高 2.15 0.0244 1.17 2.15 0.0229 1.08 
   
  2.2回收試驗取一份新鮮混合血清,ApoA1的濃度1.24g/L,將其分成6份,每管0.9m1.分別加入ApoA1為2.0g/L、1.16g/L、0.82g/L的高、中、低血清0.1ml,混合后ApoA1濃度分別為1.316g/L、1.232g/L、1.198g/L共3個濃度的樣品;用伊利康公司的ApoA1試劑共測定5次,計算回收率分別為101.3%、99.6%、100.7%,平均為100.5%。 
  2.3線性范圍測定按NCCLS[2]文件作線性評價標準,取一高值標本(ApoA1為2.0g/L)和一低值標本(ApoA1為0.5g/L),然后把2份樣本等量混勻產(chǎn)生中間值,再分別將中間值和低值,中間值和高值等量混勻,共產(chǎn)生5個不同值的樣品。在分析儀上用本試劑從低值到高值,然后從高值到低值對5個不同濃度的標本分別平行測定5次,求得均值為Y,以理論值為X,經(jīng)線性回歸分析,結(jié)果回歸方程為:Y=0.9914X+0.075,r=0.9998,稀釋變異試驗  2.4對比實驗取ApoA1濃度從0.4~2.0g/L的不同病人新鮮血清標本50份,分別用本試劑(Y)和Randox試劑(X)同時測定;測定數(shù)據(jù)均按NCCLS(EP6P)文件統(tǒng)計,結(jié)果相關(guān)系數(shù)r=0.9987,相關(guān)方程為Y=1.0251X+0.0047。 
  2.5干擾試驗將一份新鮮的混合血清,對其ApoAI進行測定,其濃度為1.36g/L,將其分成12份,在其中分別加入不同濃度的抗壞血酸、血紅蛋白、膽紅素和VLDL組份,分別測定ApoAI濃度,結(jié)果表明TG濃度<15mmol/L,抗壞血酸<4.5mmol/L、血紅蛋白<4.5g/L和膽紅素<540μmol/L時對本法無顯著性干擾。 
  3結(jié)論 
  上述實驗表明,上海恒遠生物生產(chǎn)的載脂蛋白A1檢測試劑盒結(jié)果精密度高,重復(fù)性好,日內(nèi)不精密度(CV)小于3%。與進口原裝試劑比較相關(guān)系數(shù)r=0.9987,相關(guān)方程為Y=1.0251X+0.0047。抗干擾能力強,TG濃度<20mmol/L,抗壞血酸<4.5 mmol/L、血紅蛋白<5.0g/L和膽紅素<540μmol/L時對本試劑無顯著性干擾。該試劑不僅有較大的病理結(jié)果范圍。

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