ELISA實驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,但是真正到自己上手的時候還是會犯糊涂,出狀況!如何更好地運用ELISA試劑盒、掌握ELISA實驗呢?上海恒遠技術為您講解:如何靈活運用ELISA試劑盒?
1.對于一些小分子的檢測,一般來說,要用競爭法ELISA去檢測,也要購買采用這個方法的盒子。一般細胞因子的檢測,都是采用常規的夾心法ELISA檢測,因為因子分子量比較大,一般10幾個KD左右,很容易找到兩個或者多個抗原表位。
而小分子很難找到兩個不同的表位,也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結合小分子并固相化。解決方案就是酶標板上包被二抗,每個孔加入一定量的酶標的小分子,然后加樣品,再加不帶標記的檢測抗體,顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。
2.還有一個問題,這是不是客戶的誤區,就是拿來一個指標就想當然地嘗試用ELISA去檢測。ELISA檢測方法簡單,靈敏度高,但是該檢測活性的檢測活性,該做western的做western。
上海恒遠生物對ELISA的操作提醒:
1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
4.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
5.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
要想熟練的靈活運用ELISA試劑盒,還需要多動手操作。在實驗中遇到相關技術問題,都可我司技術人員,上海恒遠生物為您解答!