山東農業大學吳老師通過對比多家ELISA試劑盒供應商的考察和了解,最后選擇了恒遠生物高敏ELISA試劑盒,并在我司購買了微生物多聚半乳糖醛酸酶(PG)ELISA試劑盒、微生物果膠裂解酶(PL)ELISA試劑盒。在實驗期間吳老師致電我司詢問Elisa注意事項,還有幾個實驗問題想要技術解答,為此,我司立刻為吳老師對接到技術,技術人員對Elisa的注意事項等問題做出了如下解答:
1. 規范加樣:不規范的移液操作可能帶來0.1%到5%的移液誤差,甚至更高!
a. 移液器定期校準:選擇密封性好質量可靠的吸頭,吸量不準確,直接影響檢測結果;
b. 加樣前,溶液充分混勻,垂直懸空加入液體,避免加在孔壁上,不可產生氣泡;
c. 加樣時避免液體濺出,如有樣本濺出,應用吸水紙輕輕拭干,并做相應記錄;
d. 如果加樣槍漏氣以至于加樣的量不夠,不能用槍吸出再加,做相應記錄實驗;
e. 每次加樣順序一致,尤其底物、終止液順序一致,保證每個孔顯色時間相同。
2. 標準品的溶解與稀釋,嚴格按說明書要求進行。
a. 粉末標準品短暫離心,讓因運輸沾到管蓋、管壁的標準品沉到管底。
b. 根據瓶標簽加入一定體積的蒸餾水(或說明書*定溶液),加水后輕柔渦旋震蕩,室溫靜置溶解10-30分鐘,讓粉末*溶解。
注意:加水(或說明書*定溶液)后暫不用移液槍吹吸,避免蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,待*溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。
3.假陽性結果和假陰性結果
a、標本的采集與保存
當標本采集保存不當產生溶血時,紅細胞中的血紅蛋白釋放到血清中,血紅蛋白具有過氧化物酶的性質,其通過吸附或“PP效應"(蛋白質間相互吸附的現象)結合后,可催化A、B液顯色而造成假陽性
b、標本采集保存不當致細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,會產生假陽性反應;標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG聚合,易使間接法的試驗本底加深。因此,標本宜在新鮮時檢測。
c、反復凍融血清會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存做多次檢測,宜少量分裝凍存。
吳老師對我們的售后技術服務很是滿意,通過技術溝通,實驗很順利的完成了,吳老師說恒遠生物的技術服務很專業,以后還會選擇恒遠生物,并給我們的技術人員點了一個大大的贊。我司秉承“信譽、質量、品牌、誠信為本"的理念,以優良的服務質量和實惠的價格,ELISA試劑盒實驗前,請仔細閱讀中英文說明書,我們提供免費代測,實驗過程指導服務。詳情可咨詢我們的在線客服。