時間過的真快,本月就要結束了,回顧前面的新聞資訊中,我公司為大家帶來的主要內容有Elisa操作技術、培養基制備流程,還有一些合作成功案例。今天,我們一起來看看五月總結培養基應用技術內容:
實驗原理:
培養基(culture medium)是根據微生物生長繁殖所需要的一定比例的營養物質(碳源、氮源等)、氫離子濃度(pH值)以及滲透壓等條件,用人工方法制成的無菌營養基質。主要用于微生物分離培養、生化鑒定和保存菌種等。培養基按物理性狀不同可分為固體、半固體和液體培養基;按性質和用途不同又可細分為基礎培養基、營養培養基、鑒別培養基、選擇培養基和特殊培養基。根據物理性狀和用途等不同常將培養基分裝于試管或平皿等容器中。常用培養基制備的一般程序是:調配成分溶解→較正pH值→過濾→分裝→滅菌→質量檢驗→保存。配制培養基時可以按照培養基配方調配各種基本成分,也可購買半成品的商品培養基干粉制劑直接配制。
應用技術:
1.培養基的脫氧:必要時,將培養基在使用前放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min;加熱時松開容器的蓋子;加熱后蓋緊,并迅速冷卻至使用溫度。
2.廠家已做過適用性檢查的,是否還需進行適用性檢查?答:廠家的適用性檢查不能代表某個特定的實驗室,實驗室在購入培養基后,應根據本實驗室的配制和滅菌方法進行適用性檢查。
3.添加成分的加入:對熱不穩定的添加成分應在培養基冷卻至47℃~50℃時再加入。無菌的添加成分在加入前應先放置到室溫,避免冷的液體造成瓊脂凝結或形成片狀物。將加入添加成分的培養基緩慢充分混勻,盡快分裝到待用的容器中。
4.培養基的有效期一般可以控制在多長時間?答:無菌檢查的培養基貯存期限可參見藥典規定。微生物限度檢查的培養基,應對保存期進行驗證。
5.培養基適用性檢查中,五種菌液是否都要制備使用?答:計數培養基的適用性檢查五種試驗菌均應使用。
6.如何準確方便的控制培養基的PH值?答:在滅菌前測定和調節培養基的pH值。
7.培養基在滅菌后測其PH值,像營養瓊脂在冷卻到室溫25℃時已經凝結,該如何測定?答:在滅菌前測定何調節pH值。
保存方法:
制備好且標記清楚的培養基置于4 ℃冰箱保存備用,嚴格滅菌后的培養基一般可保存1周以上,但不宜過久。注意平板培養基應底上蓋下倒置保存,以防止蓋內水蒸汽落在培養基表面,使得培養基表面粘滯易污染且不易接種;液體、半固體等培養基應直立保存。
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