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羥自由基清除能力測定試劑盒 微量法

更新時間:2023-03-20

簡要描述:

恒遠生物生化試劑盒應用領域廣泛,涉及酶類、氧化應激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富,主要的檢測儀器為酶標儀,分光光度計和熒光酶標儀。我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高效專業的生化代測服務和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間,所有這些保證了我們向您提供的專業優質的服務。

型號:點擊量:1097
中文名稱

羥自由基清除能力測定試劑盒

規格96樣
貨號

A-037-SH

價格面議
樣本類型血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養上清液等
檢測范圍詳見說明書
檢測方法

微量法

貨期3-5天
說明書咨詢我司業務員獲取
文獻咨詢我司業務員獲取


  正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

羥自由基作用于體內蛋白質、核酸、脂類等生物分子,造成細胞結構和功能受損,進而導致體內代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應用。

測定原理

H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應產生羥自由基,將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化為Fe3+ ,導致536nm吸光度下降,樣品對536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了樣品清除羥自由基的能力。


自備用品:

恒溫水浴鍋、酶標儀、96孔板和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體100 mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體12mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體6mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體12 mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體6mL×1瓶,4℃保存。

樣品的制備:

1. 組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2. 血清、果汁等液體樣品可直接測定。

3. 提取物(或者藥物)可配制成一定濃度,如5 mg/mL。


操作步驟:

1、 酶標儀預熱30min,調節波長至536nm。

2、 工作液配制:使用之前按照每管試劑一:試劑二:試劑三=100:50:100(µL)的比例配制,用多少配多少,混勻。

3、 EP管中加入如下試劑


空白管

對照管

測定管

工作液µL)

250

250

250

混勻,防止局部顏色過濃

樣品(µL)



50

試劑四(µL)


50

50

H2O(µL)

100

50


混勻,37℃保溫60min,8000g 25℃離心5min,吸取200μL于96孔板中測定536nm處吸光值,空白管、對照管和測定管的吸光值分別記為A空、A對和A測。

注意:空白管和對照管只需測定一次。


計算公式:

羥自由基清除率 D% =(A測-A對)÷(A空-A對)×100%

A空、A對、A測:空白管、對照管和測定管的吸光值。


注意事項:

為了比較不同樣品羥自由基清除能力,對于同一批樣品必須加入等量的樣品,血清、組織勻漿、果汁等液體樣品加入同樣體積,提取物(或者藥物)配制成同樣濃度。




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