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九月學習:ELISA試劑盒技術資料

更新時間:2014-09-12   點擊次數:1191次

    新學期已經進行兩周了,九月也近乎中旬,那么面對新學期的開始,是不是讓不少ELISA實驗的新手同學們有點兒手足無措呢?下面一起來看下上海恒遠今天為您分享的實驗內容吧,九月學習:ELISA試劑盒技術資料。
·DIY夾心法ELISA常見技術指南 
    選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節,將凍干的細胞因子復溶。
    一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。為了優化靈敏度,建議放置一個晚上孵育標準品和標本。若使用過氧化物酶作為顯色系統,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。當測定混合液體中的抗原時。
    
·ELISA用處
  1. 將酶催化反應的放大作用和抗原抗體親和反應的高度專一性、特異性相結合,以酶標記的抗原或抗體作為主要試劑進行免疫測試,所以具有很高的靈敏度。
  2. 實現了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對其進行定量。
  3. 其抗原抗體反應具有高度的特異性。
  4. 為濃縮液,配有稀釋液,稀釋后直接可用,無需另行配置。
·灰區的設置
    通常情況下,ELISA定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定結果報告的依據。
·標本復查
    ELISA手工檢測過程復雜,影響因素較多,即使室內質控在控,也可能因孔間差異而造成結果的差異,因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法,比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結果進行復查。
    了解更多相關ELISA試劑盒技術資料,歡迎您關注上海恒遠生物公司,購我司試劑盒有任何相關問題咨詢,我公司技術人員會在半個工作日內給出解決方案。




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